近年來,我國的食品安全突發(fā)事件層出不窮。而這些食品安全問題大多源于食源性致病菌的污染和食品生產(chǎn)、加工過程中對農(nóng)藥、獸藥、添加劑等的不科學使用,甚至是違用、濫用等違法、違規(guī)行為所致。要從根本上解決食品安全問題,就必須對食品的生產(chǎn)、加工、流通和銷售等各環(huán)節(jié)實施全程管理和監(jiān)控,食品安全快檢技術(shù)也就隨之應運而生。
“實驗室檢測方法和儀器很難及時、快速而全面的從各環(huán)節(jié)監(jiān)控食品安全狀況,而快速、方便、準確、靈敏是食品安全快檢技術(shù)的最大優(yōu)勢?!敝袊鴻z驗檢疫科學研究院首席科學家鄒明強說。
以前,檢測瘦肉精、三聚氰胺需要價值數(shù)百萬元甚至上千萬元的儀器設備,如今,一張價值幾元的檢測卡插在豬尿和牛奶中,幾分鐘就會顯示結(jié)果。一個粉筆盒大小的試劑盒,可以精確地檢測出食品中是否含有對人體有害的農(nóng)獸藥殘留物及其含量??這就是食品安全快檢的“魔力”。
“以試劑盒、ELISA、PCR、納米生物技術(shù)、生物傳感技術(shù)、便攜式分析儀器等為代表的快速檢測、移動檢測技術(shù)在中國食品安全保障體系中扮演著重要的角色。”鄒明強認為,其中生物傳感器技術(shù)具有快速、靈敏、特異、簡便等特點,在食品檢測領(lǐng)域具有廣闊的應用前景。
近幾年,在鄒明強的帶領(lǐng)下,中國檢驗檢疫科學研究院研究團隊針對禽流感、甲型H1N1流感和瘦肉精等重大公共衛(wèi)生安全事件迫切的檢測技術(shù)需求,基于微納生物傳感技術(shù),以發(fā)展“既快又靈”的高效檢測技術(shù)為目標,通過原理創(chuàng)新和技術(shù)發(fā)明,構(gòu)建了服務于食品和公共衛(wèi)生安全保障的檢測方法系統(tǒng)。該項目榮獲2014年度北京市科學技術(shù)獎一等獎。
小小快檢用處大
據(jù)了解,食品質(zhì)量安全檢測方法有很多,包括現(xiàn)場檢測方法,實驗室定量檢測方法,以及確認方法等。從實驗室檢測來看,快速檢測方法其實是起到了有益的補充,這是由它自身的特點決定的。與傳統(tǒng)儀器方法相比,快檢技術(shù)快速、簡單,可以測固體及液體樣品。而且快速檢測對配套的前處理設備要求不高,可以允許提取樣品中雜質(zhì)成分的存在,同時也就決定了其市場地位在篩選中的必須性,這樣可以與高檔的儀器進行互補,以快速檢測方法進行初篩,再用儀器方法進行確證,從而構(gòu)建效率和準確度均較高的檢測體系。
快速檢測的優(yōu)勢在于前端,直接性、時效性、現(xiàn)場感??焖贆z測的形式是與生產(chǎn)現(xiàn)場、時間要求相結(jié)合,而傳統(tǒng)的實驗室檢測通常用時較長,例如將產(chǎn)品送到第三方檢測中心進行檢測,快則幾日,慢則一兩周,對于生產(chǎn)經(jīng)營者來講,時間成本的損耗是巨大的。這就需要企業(yè)自身在生產(chǎn)初期、源頭位置對風險加以把控。產(chǎn)品質(zhì)量安全需要依靠質(zhì)量管理與前端風險排查、檢測,這樣才有可能在產(chǎn)品出廠前,最大程度保證其質(zhì)量安全。
構(gòu)建“既快又靈”的檢測技術(shù)系統(tǒng)
據(jù)了解,現(xiàn)有快檢技術(shù),主要為膠體金免疫層析法和酶聯(lián)免疫吸附法,雖然操作簡便、成本低,但其靈敏度不夠高?!叭绻麖娬{(diào)靈敏準確,則難于實現(xiàn)便捷,存在‘靈而不快’問題,導致安全因子發(fā)現(xiàn)不及時;若兼顧快速、高通量,則不宜實現(xiàn)靈敏可靠,存在‘快而不靈’問題,導致誤檢和漏檢,留下安全隱患?!编u明強說,“既靈敏又快速”的檢測技術(shù)成為亟待攻克的技術(shù)難題。
生物傳感器檢測技術(shù)系以識別元件(酶、抗體/抗原、核酸、標記材料等)為特異性載體而轉(zhuǎn)換為電、光、磁等信號實現(xiàn)檢測,為解決上述問題提供了新興的技術(shù)途徑。
“針對我國食品和公共衛(wèi)生安全檢測的更高要求,亟待開展融合前沿微納米技術(shù)的現(xiàn)代生物傳感檢測技術(shù)攻關(guān),大幅度提升檢測靈敏度、定量化、通量、多靶分型和同檢等分析性能,實現(xiàn)既快又靈檢測,提供高效、實用、便捷、可靠的快檢解決方案,破解‘檢不出’‘檢不準’‘檢不快’難題,為食品和公共衛(wèi)生安全提供服務和技術(shù)支撐?!编u明強表示。
在鄒明強的帶領(lǐng)下,研發(fā)團隊通過研究納米金顆粒原位聚集效應,建立層析快檢卡通用增敏技術(shù),開發(fā)熒光膠乳定量試紙條及熒光檢測儀,解決“快而不靈”的問題,實現(xiàn)高危病原“既快又準”檢測。
項目團隊提出了流式技術(shù)競爭式免疫分析新原理,發(fā)明了編碼微球及熒光探針試劑制備技術(shù),開發(fā)多種小分子同步檢測方法,解決“靈而不快”的問題,實現(xiàn)多種農(nóng)獸藥高通量篩檢,引入不確定度概念,保證檢測結(jié)果客觀、準確;闡明酶分子構(gòu)象穩(wěn)定機制,突破抗原決定簇類結(jié)構(gòu)修飾難題,建立酶活性保護技術(shù)與類特異抗體制備技術(shù),開發(fā)類檢試劑盒(卡),解決農(nóng)獸藥類檢穩(wěn)定性及包容性難題,并開發(fā)共軛濾光定量檢測器,實現(xiàn)層析快檢卡數(shù)字判讀;集成熒光探針、生物信號轉(zhuǎn)導等,建立分子馬達核酸分型傳感檢測技術(shù),實現(xiàn)食源性病原菌多型同檢。
“由此我們構(gòu)建了‘既快又靈’的檢測技術(shù)系統(tǒng),成果應用實現(xiàn)標準化及產(chǎn)業(yè)化,為提升公共衛(wèi)生安全應對能力提供檢測技術(shù)支持?!编u明強說。
傳統(tǒng)檢測技術(shù)實現(xiàn)飛躍
“該項目綜合利用多項微納生物傳感技術(shù),建立了系列高靈敏高通量檢測技術(shù),在實現(xiàn)技術(shù)創(chuàng)新的同時也推動了相關(guān)技術(shù)的進步?!编u明強說。
首先,項目技術(shù)改善提升了傳統(tǒng)檢測技術(shù)水平,實現(xiàn)了傳統(tǒng)檢測技術(shù)的飛躍。膠體金免疫層析檢測技術(shù)具有簡便快速、成本低等優(yōu)勢,現(xiàn)場檢測應用廣泛,但靈敏度低與不能定量檢測大大限制了它的應用范圍。該項目建立了納米金增敏技術(shù),大幅度提高傳統(tǒng)膠體金檢測方法的靈敏度,在與禽流感國家標準檢測方法的比對測試中,準確度一致,靈敏度相當,增敏技術(shù)使膠體金檢測技術(shù)達到了定量PCR的水平,有效提高了疫病防控水平。
同時,項目研發(fā)團隊用熒光標記取代了傳統(tǒng)的金標記,實現(xiàn)了層析檢測的定量檢測,更加擴展了層析檢測技術(shù)的應用范圍,特別是通過目標物含量的多少來進行的檢測。“這項技術(shù)使傳統(tǒng)免疫層析技術(shù)實現(xiàn)了靈敏度大幅提升與定量測定?!编u明強說。
其次,該項目是多技術(shù)交叉融合,通過合力提升了技術(shù)水平。在流式熒光編碼微球檢測技術(shù)中,應用化學與材料技術(shù)合成了量子點等標記物,應用生物技術(shù)實現(xiàn)了目標物的準確捕獲,在檢測結(jié)果的判定中又引入了不確定度等統(tǒng)計學概念,使檢測結(jié)果更加客觀科學,幾種技術(shù)集合在一起形成的是具有多種優(yōu)點的檢測技術(shù)。
最后,根據(jù)應用需求,建立了點面結(jié)合的檢測技術(shù)。準確測定目標物是檢測技術(shù)的終極目標,而測定類別也具有廣泛的實際需求。然而,目前廣泛使用的農(nóng)殘酶抑制法快篩法,因酶試劑難于在通常條件下保存和運輸,制約了該法的應用可靠性。
“該項目發(fā)明了穩(wěn)定貯藏酶試劑配方,有效保障了該方法的可靠性,提高了其應用價值,該方法一次可檢測涵蓋約300種高毒農(nóng)藥?!编u明強說。
據(jù)了解,該項目團隊圍繞快檢儀器、試劑(卡、盒)及方法構(gòu)建了較為完整的快檢技術(shù)系統(tǒng),獲國際專利授權(quán)1項,國家發(fā)明專利授權(quán)15項,軟件著作權(quán)1項,制定國標3項,醫(yī)療器械注冊證6項,發(fā)表SCI論文35篇。項目禽流感層析傳感增敏技術(shù)經(jīng)第三方檢測機構(gòu)驗證,與國標定量PCR法檢測結(jié)果一致且靈敏度相當;參加全國甲型H1N1流感雙盲雙測篩選名列第一;鑒定意見認為項目整體技術(shù)達到國際先進水平。
“項目以需求為牽引,以應用為導向,利用微納生物傳感技術(shù)實現(xiàn)了檢測技術(shù)的突破,既推動了檢測技術(shù)的進步,也反饋促進了微納生物傳感技術(shù)的發(fā)展?!编u明強說。
項目成果開花結(jié)果
如今,項目成果已廣泛用于甲型H1N1流感全國聯(lián)防聯(lián)控、國境檢驗檢疫、國家殘留監(jiān)控計劃、北京奧運和上海世博會食品安全保障,大力促進了我國應對公共衛(wèi)生安全水平提升。
據(jù)了解,自2005年以來,項目團隊基于項目微納生物傳感原理開發(fā)了系列快速檢測技術(shù)及產(chǎn)品,并積極進行產(chǎn)品規(guī)?;a(chǎn),開拓產(chǎn)品市場,為科技成果轉(zhuǎn)化樹立了良好典范,陸續(xù)在我國出入境檢驗檢疫、農(nóng)業(yè)、工商、質(zhì)監(jiān)和衛(wèi)生等200多個食品檢測機構(gòu)和1000多家企業(yè)得到廣泛應用,出口至20多個國家或地區(qū)。
北京勤邦生物公司基于該項目核心技術(shù)開發(fā)的磺胺類十五合一試劑盒、磺胺類試紙條、喹諾酮類試劑盒、喹諾酮類試紙條、四環(huán)素類試劑盒、四環(huán)素類試紙條、β-內(nèi)酰胺類+四環(huán)素類二聯(lián)卡、呋喃西林代謝物試劑盒產(chǎn)品顯著提高了檢測性能,實現(xiàn)了多靶同檢,大幅提升了企業(yè)自檢自控能力,取得了良好的社會效益和經(jīng)濟效益。
據(jù)介紹,勤邦公司的部分產(chǎn)品性能指標優(yōu)于國外產(chǎn)品,檢測成本僅為同類產(chǎn)品的2/3,有效替代進口產(chǎn)品。檢測集約化和多元化,檢測效率高,檢測成本低,節(jié)約了資金。相關(guān)快檢產(chǎn)品被評為“中關(guān)村國家示范區(qū)新技術(shù)新產(chǎn)品”,并出口至印度、泰國、新加坡等10多個國家,近三年經(jīng)濟效益顯著。
“如今,利用該項目成果的快檢產(chǎn)品已廣泛應用于全國各地蔬菜、水果農(nóng)殘檢測?!编u明強介紹說,寧夏天然蜂產(chǎn)品公司應用項目成果進行產(chǎn)品自檢自控,有效保障了其產(chǎn)品質(zhì)量安全,“十里花”蜂產(chǎn)品暢銷國際市場?!皯庙椖靠鞕z技術(shù)縮短檢驗周期,提高檢測效率,保障了50多億元銷售額產(chǎn)品安全”。